В експериментах з культурою клітин, піпетки використовуються дуже часто, а точність їх роботи безпосередньо впливає на надійність та повторюваність експериментальних результатів. Нижче наведено кілька порад щодо роботи піпетки в культурі клітин, які, сподіваюся, будуть корисними для вашого експерименту.
1. Виберіть правильну піпетку та наконечник
- Вибір піпетки: Виберіть правильну піпетку відповідно до об'єму рідини, яка повинна бути передана. Нормальний діапазон робочих обсягів більшості піпетки становить 10-100% зазначеного діапазону. Намагайтеся уникати встановлення обсягу піпетки менше 10% від максимального об'єму, і використовуйте піпетку з невеликим діапазоном для операцій з невеликим об'ємом.
- Вибір наконечника: Виберіть наконечник, яка відповідає піпетку, і переконайтеся, що наконечник щільно вставлений, щоб уникнути витоку повітря. Крім того, для конкретних експериментів (наприклад, асептичної роботи) слід вибрати автоклавні наконечники.
2. Промийте наконечник
Промийте наконечник 2-3 разів, щоб сформувати однорідну плівку в кінчику, тим самим покращуючи точність піпетки. Крім того, він може нейтралізувати капілярний ефект у мікропіпети, що може зробити температуру всередині наконечника відповідно до температури зразка для піпетки з великим обсягом. Слід зазначити, що промивання може негативно вплинути на результати при піпельті гарячих та холодних розчинів.
3. Контролюйте швидкість прагнення та надання
- Гладке натискання: Натисніть і випустіть кнопку управління плавно та безперервно, а не натискання та випуск її раптово. Це може уникнути утворення бульбашок та підвищення точності піпетки.
- Пауза: Після прагнення рідини залиште наконечник у рідині приблизно на 1 секунду, особливо для цих в'язких рідин. Негайно витягнути наконечник може призвести до неповного рідкого прагнення.
4. Зверніть увагу на глибину занурення наконечника
- Мікропіпеета: наконечник повинен бути занурений 2-3 мм.
- Піпетка з великим діапазоном: глибина занурення повинна бути 5-6 мм. Якщо наконечник занурений занадто глибоко, повітря всередині наконечника буде стиснути, що спричиняє аспірування занадто багато рідини. Рідина, що залишилася на поверхні наконечника, також може впливати на результати.
5. Вертикальна операція
Пориньте піпетку в зразок якомога вертикально, бажано, не відхиляючись від вертикального положення більш ніж на 20 градусів. Окрім підвищення точності об'єму піпетки, це також може запобігти потраплянню рідини в піпетку через надмірне нахил.
6. Поспостерігайте за кінчиком піпетки
Готуючись до викиду рідини, зверніть увагу на те, чи є надлишки крапельки, прикріплені до поверхні наконечника піпетки. Після розряду рідини кінчик наконечника піпетки можна торкнутися до сторони ємності, щоб переконатися, що розряд буде досить ретельним, щоб не допустити останньої краплі рідини на кінчику кінчика піпетки.
7. Виберіть відповідний метод піпетки
- Позитивний метод всмоктування: підходить для більшості рідин. Під час смоктання рідини натисніть кнопку до першої точки зупинки, а потім повільно відпустіть кнопку, щоб повернутися до початкової точки. Потім натисніть кнопку до першої точки зупинки, щоб скинути рідину, пауза на деякий час і продовжуйте натискати кнопку до другої точки зупинки, щоб вибухнути рідину, що залишилася. Нарешті відпустіть кнопку.
- Метод відсмоктування назад: підходить для високо в'язких рідин, біологічно активних рідин, легкопінних рідин або надзвичайно невеликих кількостей рідин. Спочатку смокчуть більше рідини, ніж встановлений діапазон, і не вибухайте решту рідини при передачі рідини.
8. Зберігайте піпетку в чистоті та підтримці
- Регулярна калібрування: Після використання піпетки протягом певного періоду часу його потрібно відкалібрувати, щоб забезпечити його точність.
- Очищення: Після кожного використання піпетку слід очистити вчасно, щоб уникнути залишкової рідини від забруднення наступного експерименту.
9. Асептична операція
У клітинній культурі асептична операція дуже важлива. Використовуючи піпетку, зверніть увагу на наступні моменти:
- Дезінфекція: Перед використанням протріть піпетку та наконечник з алкогольною кулькою для дезінфекції.
- Уникайте перехресного забруднення: використовуйте новий наконечник для кожного зразка, щоб уникнути перехресного забруднення.
За допомогою вищевказаних порад ви можете використовувати піпетки для експериментів з культурою клітин більш точно та ефективно та покращити надійність та повторюваність експериментальних результатів. Я сподіваюся, що ці поради допоможуть вам!